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アイテム
X線照射されたDNAに対する非照射細胞内の修復応答の研究
https://repo.qst.go.jp/records/66451
https://repo.qst.go.jp/records/66451de88536b-a0bd-4341-9b1e-c8b35e89f6f3
| Item type | 会議発表用資料 / Presentation(1) | |||||
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| 公開日 | 2017-09-25 | |||||
| タイトル | ||||||
| タイトル | X線照射されたDNAに対する非照射細胞内の修復応答の研究 | |||||
| 言語 | ||||||
| 言語 | jpn | |||||
| 資源タイプ | ||||||
| 資源タイプ識別子 | http://purl.org/coar/resource_type/c_c94f | |||||
| 資源タイプ | conference object | |||||
| アクセス権 | ||||||
| アクセス権 | metadata only access | |||||
| アクセス権URI | http://purl.org/coar/access_right/c_14cb | |||||
| 著者 |
小畑, 結衣
× 小畑, 結衣× 横谷, 明徳× 神長, 輝一× 中上, 裕貴× 小畑 結衣× 横谷 明徳× 神長 輝一× 中上 裕貴 |
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| 抄録 | ||||||
| 内容記述タイプ | Abstract | |||||
| 内容記述 | 放射線が与える生物影響の中には、DNA分子上の局所で多重に損傷が生じるクラスター損傷が知られている。二本鎖切断のDNA修復動態や機構については研究が進んでいるが、クラスター損傷によって生じる非二本鎖切断型のDNA損傷は検出が難しく未だに明らかにされていない。放射線で誘発されたクラスター損傷の修復動態を調べることが出来れば、クラスター損傷の生物影響についての理解が進むと期待されている。放射線照射による細胞への損傷はDNAだけでなく細胞膜や細胞小器官にも影響が及ぶ。そのため、細胞に照射を行うのではなく放射線照射したDNAを非照射細胞に導入することでゲノムDNA以外の被ばくによる影響を避けることが可能となる。 本研究では、蛍光タンパク質の合成遺伝子を持つプラスミドDNA水溶液(1×TE buffer)にX線を照射することでDNAに一本鎖切断や塩基損傷を含む様々な損傷を誘発させた後、哺乳動物細胞へリポフェクションにより形質転換を行う。照射プラスミドDNAを導入した細胞と非照射プラスミドDNAを導入した細胞を、蛍光顕微鏡を用いてライブセル観察を行うことでGFP発現量の時間動態を明らかにし、非照射細胞内における照射DNAに対する修復ダイナミクスを明らかにしていく。さらに、水和プラスミドフィルムを試料として用いることでOHラジカルによる間接効果を制限し、直接効果によりクラスター損傷が生じやすい環境下での照射実験も行う。一方、DNA二本鎖切断修復経路の一つである非相同末端結合(NHEJ：Non- Homologous End Joining)に関わるタンパク質をノックダウンした細胞を使い、プラスミドを修復する際のNHEJの寄与を検討したいと考えている。これまでに予備的な実験として、酵素処理によるプラスミドのコンフォメーションを変えたときの形質転換効率を検討した。さらにX線を照射したプラスミドを用いても形質転換を試みたので、これらの結果を比較する。 |
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| 会議概要（会議名, 開催地, 会期, 主催者等） | ||||||
| 内容記述タイプ | Other | |||||
| 内容記述 | 平成29年度専門研究会 | |||||
| 発表年月日 | ||||||
| 日付 | 2017-09-03 | |||||
| 日付タイプ | Issued | |||||
