@misc{oai:repo.qst.go.jp:00068976, author = {鈴木, 桂子 and 田中, 泉 and ノントプラサート, アピチャート and 槫松, 文子 and 石原, 弘 and 鈴木 桂子 and 田中 泉 and 槫松 文子 and 石原 弘}, month = {Sep}, note = {これまで我々は定量的real-time RT-PCR法を用いて、マウスmacrophage細胞RAW 264.7におけるheme oxygenase-1(HO-1)遺伝子のmRNAの定量法を確立し、カフェイン酸フェネチルエステル (CAPE)および15-deoxy-delta12,14-prostaglandin J2 (15d)によりHO-1遺伝子の強力な転写活性化が起こることを報告してきた。本研究では、同じ培養系を用いて遺伝子産物であるHO-1タンパクをエンザイムイムノアッセイ法で測定した。 [方法] RAW細胞を、300 nM-15d, 2 microM-CAPE, 30 microM-diethyl maleate (DEM), 10 mM-cysteamineで、4時間と8時間処理した。その後細胞を界面活性剤NP-40を含むbufferで融解し、NP-40の影響を受けないBCA Protein Assay Kit (Pierce)でタンパク量を測定した。同じタンパク量の細胞融解液を用いて、HO-1タンパク量をMouse Heme Oxygenase-1 Enzyme Immunoassay Kit (Takara)で測定した。 [結果] 300 nM-15dを加えて4時間後 HO-1タンパク量は対照群の11倍になり、2 microM-CAPEを加えた細胞では5.2倍になった。また15d, CAPEより高濃度を必要としたが、30 microM-DEMと10 mM-cysteamineでも3.8倍と1.7倍に増加した。それぞれの薬品を加えて8時間後にはHO-1タンパクの量は更に増加したが、全体の傾向は変らなかった。このように低濃度の15dとCAPEによる強力なHO-1タンパク誘導活性が示された。これまでの研究で我々は、上記濃度の15d, CAPE, DEM, cysteamineによりHO-1 mRNA量がそれぞれ44, 39, 9.4, 3.4倍になることを報告しているので、今回測定したHO-1タンパク量はmRNA量をよく反映している。従って、15dやCAPEの生物作用に細胞保護作用を持つHO-1の関与が示唆される。, 日本放射線影響学会第49回大会}, title = {カフェイン酸フェネチルエステル、15-deoxy-delta12,14-prostaglandin J2処理による、マウスmacrophage細胞RAW 264.7におけるheme oxygenase-1タンパクの誘導}, year = {2006} }