@misc{oai:repo.qst.go.jp:00068024,
 author = {岡本, 正則 and その他 and 岡本 正則},
 month = {Sep},
 note = {ＥＳ細胞を用いた簡便な凝集キメラマウスの作製法
○海野あゆみ１・２，法喜ゆう子３，中村美樹４，荒木良子３・４，安倍真澄３・４，岡本正則２
１サイエンス・サービス，２放医研・実験動物，３放医研・遺伝子発現，４放医研・先端遺伝子発現センター
\n【目的】私達は、放射線感受性等に関連する新規遺伝子を導入した遺伝子改変マウスの作製実験を実施しているが、実験施設・設備・機器等に制約がある。そこで本実験では、胚性幹（ＥＳ）細胞を用いた凝集キメラマウスの作製にあたり、簡便で実用的な実験系を確立する目的により市販の胚培養用培地について検討を行った。その結果、高率に凝集キメラマウスが得られたので報告する。
【方法】培地はＳＩＧＭＡ製のＭ２、Ｍ１６を用い、使用毎に調整した。宿主胚は、Ｍ２培地を用い常法により交配確認後２日目の過排卵処理したＢＤＦ１系成熟雌マウス（７〜１４週齢：ＳＬＣ・日本クレア）から回収した。胚は酸性タイロードにより透明帯除去後、Ｎａｇｙらの方法（１９９３）を改変した凝集キメラマウス作製法を用いてＥＳ細胞と凝集させ、Ｍ１６培地で一晩炭酸ガス培養装置内にて培養した。約２０時間培養後、胚盤胞期胚への発生を観察し、偽妊娠雌マウスの子宮に移植した。移植後に産子への発生率、産子の毛色によるキメラ発生率、得られたキメラ個体の毛色によるキメリズムについて検討した。
【結果と考察】Ｓｌｃ及びＪｃｌ由来の系統マウスを用いた結果は、胚盤胞期への発生率がそれぞれ６４．２％、５５．２％、産子の発生率が２０．７％、１６．６％、産子数に対するキメラの発生率が５６．３％、２９．２％となった。また産子数に対する毛色によるキメリズムが７０％以上の雄個体出現率は、それぞれ４５．０％、３５．７％となった。以上の結果から、本実験系は凝集キメラマウス作製に有用であることが分かり、簡便で実用的な方法と考えられる。今後は、種々の生殖工学技術を組み込み、より実用的な実験系の確立を目指し検討したい。, 第97回日本繁殖生物学会大会},
 title = {ＥＳ細胞を用いた簡便な凝集キメラマウスの作製法},
 year = {2004}
}